化學(xué)發(fā)光試劑已經(jīng)由最初的魯米諾、異魯米諾試劑,發(fā)展到光澤精、吖啶酯、AMPPD以及三聯(lián)吡啶釕電化學(xué)發(fā)光試劑,技術(shù)上已經(jīng)有了重大飛躍,在體外診斷技術(shù)中的占比已達(dá)到50%。化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)發(fā)展迅速,其基本的原理都是類似的。
化學(xué)發(fā)光免疫分析定義
反應(yīng)體系中的某種物質(zhì)的分子(如魯米諾、吖啶酯),包括反應(yīng)物、產(chǎn)物、中間體或熒光物質(zhì),吸收了反應(yīng)所釋放的能量而有基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再次回到基態(tài)時(shí),會(huì)將能量以熱或者光的形式輻射出來,如輻射的是可見光則就是化學(xué)發(fā)光。將化學(xué)發(fā)光反應(yīng)用于分析化學(xué),根據(jù)某一時(shí)刻的發(fā)光強(qiáng)度或反應(yīng)的發(fā)光總量來確定體系相應(yīng)組分含量的分析方法,即為化學(xué)發(fā)光分析,與免疫反應(yīng)結(jié)合則為化學(xué)發(fā)光免疫分析。
化學(xué)發(fā)光必要條件
一是反應(yīng)能釋放一定的能量,且能量可以被某種產(chǎn)物或中間體吸收,使之處于激發(fā)態(tài);二是這種激發(fā)態(tài)物質(zhì)具有一定的化學(xué)發(fā)光量子產(chǎn)率,或者可以將其能量有效地轉(zhuǎn)移給某種熒光物質(zhì),產(chǎn)生光輻射。
化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)
1. 螢火蟲體內(nèi)的生物發(fā)光即是一種化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生的。
2. 洛酚堿(三苯基咪唑)在堿性介質(zhì)中被過氧化氫等試劑氧化時(shí)發(fā)出綠色的光。
3. 魯米諾(3-氨基鄰苯二甲酰肼)在堿性介質(zhì)中氧化發(fā)光,氧化的條件可以是血跡(血紅蛋白)、漂白劑等氧化劑,或者是過氧化物酶存在下的過氧化氫。
4. 光澤精(N,N-二甲基二吖啶硝酸鹽)與過氧化氫反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光
5. 吖啶酯堿性條件下唄過氧化氫氧化直接產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,此外還有三聯(lián)吡啶釕的電化學(xué)發(fā)光等等。
多種類型的吖啶酯及其它試劑的發(fā)光標(biāo)記物應(yīng)用技術(shù)也日趨先進(jìn),化學(xué)發(fā)光分析不適用任何光源,避免了背景光雜散光干擾,靈敏度達(dá)到納克級(jí)、皮克級(jí)或更高。德晟是化學(xué)發(fā)光試劑研發(fā)企業(yè),可提供多種魯米諾、吖啶酯等化學(xué)發(fā)光試劑。